It wiidferspraat gebrûk fan syntetyske pestiziden hat laat ta in protte problemen, ynklusyf it ûntstean fan resistente organismen, miljeu-degradaasje en skea oan minsklike sûnens. Dêrom, nije microbialbestridingsmiddelsdy't feilich binne foar minsklike sûnens en it miljeu binne driuwend nedich. Yn dizze stúdzje waard rhamnolipide biosurfactant produsearre troch Enterobacter cloacae SJ2 brûkt om toxiciteit te evaluearjen foar mosquito (Culex quinquefasciatus) en termite (Odontotermes obesus) larven. De resultaten lieten sjen dat d'r in dose-ôfhinklike mortaliteitsrate wie tusken behannelingen. De LC50 (50% deadlike konsintraasje) wearde op 48 oeren foar termite en mosquito larval biosurfactants waard bepaald mei in net-lineêre regression curve fitting metoade. De resultaten lieten sjen dat de 48-oere LC50-wearden (95% fertrouwen ynterval) fan larvicidale en antitermytaktiviteit fan 'e biosurfactant 26.49 mg / L (berik 25.40 oant 27.57) en 33.43 mg / L (berik 31.09 oant 35. Neffens histopatologysk ûndersyk, behanneling mei biosurfactants feroarsake slimme skea oan organelle weefsels fan larven en termites. De resultaten fan dizze stúdzje jouwe oan dat de mikrobiale biosurfactant produsearre troch Enterobacter cloacae SJ2 in poerbêste en potinsjeel effektyf ark is foar Cx-kontrôle. quinquefasciatus en O. obesus.
Tropyske lannen ûnderfine in grut oantal mosquito-borne sykten1. De relevânsje fan mosquito-borne sykten is wiidferspraat. Mear as 400.000 minsken stjerre elk jier oan malaria, en guon grutte stêden belibje epidemyen fan serieuze sykten lykas dengue, giele koarts, chikungunya en Zika.2 Vector-borne sykten wurde ferbûn mei ien op de seis ynfeksjes wrâldwiid, mei muggen feroarsaakje de measte wichtige gefallen3,4. Culex, Anopheles en Aedes binne de trije muggengenera dy't it meast ferbûn binne mei oerdracht fan sykte5. De prevalens fan dengue-koarts, in ynfeksje oerbrocht troch de Aedes aegypti-mug, is yn 'e ôfrûne desennia tanommen en foarmet in wichtige bedriging foar folkssûnens4,7,8. Neffens de Wrâldsûnensorganisaasje (WHO) is mear as 40% fan 'e wrâldbefolking it risiko fan dengue-koarts, mei 50-100 miljoen nije gefallen dy't jierliks foarkomme yn mear as 100 lannen9,10,11. Dengue-koarts is in grut probleem foar folkssûnens wurden wurden, om't har ynsidinsje wrâldwiid is tanommen12,13,14. Anopheles gambiae, ornaris bekend as de Afrikaanske Anopheles-mug, is de wichtichste fektor fan minsklike malaria yn tropyske en subtropyske regio's15. West-Nyl-firus, Sint-Louis-encefalitis, Japanske encephalitis en firale ynfeksjes fan hynders en fûgels wurde oerdroegen troch Culex-muggen, faaks wol gewoane hûsmuggen neamd. Derneist binne se ek dragers fan baktearjele en parasitêre sykten16. D'r binne mear as 3.000 soarten termiten yn 'e wrâld, en se besteane al mear as 150 miljoen jier17. De measte pleagen libje yn 'e boaiem en fiede op hout en houtprodukten mei cellulose. De Yndiaaske termyt Odontotermes obesus is in wichtige pest dy't grutte skea feroarsaket oan wichtige gewaaksen en plantaazjebeammen18. Yn lânbougebieten kinne termytoanfallen yn ferskate stadia enoarme ekonomyske skea oanrjochtsje oan ferskate gewaaksen, beamsoarten en boumaterialen. Termiten kinne ek minsklike sûnensproblemen feroarsaakje19.
De kwestje fan ferset fan mikro-organismen en pleagen yn hjoeddeistige farmaseutyske en agraryske fjilden is kompleks20,21. Dêrom moatte beide bedriuwen sykje nei nije kosten-effektive antimykrobialen en feilige biopestisiden. Syntetyske pestiziden binne no beskikber en it is oantoand dat se besmetlik binne en net-doel-geunstige ynsekten ôfstoart22. De lêste jierren is ûndersyk nei biosurfactants útwreide fanwege har tapassing yn ferskate yndustry. Biosurfactants binne tige nuttich en fitaal yn lânbou, boaiemsanearring, petroleumwinning, baktearjes en ynsektenferwidering, en itenferwurking23,24. Biosurfactants as mikrobiële surfactants binne biosurfactant gemikaliën produsearre troch mikroorganismen lykas baktearjes, gisten en skimmels yn kusthabitaten en oalje-fersmoarge gebieten25,26. Gemysk ôflaat surfactants en biosurfactants binne twa soarten dy't direkt wurde krigen fan 'e natuerlike omjouwing27. Ferskate biosurfactants wurde krigen út marine habitats28,29. Dêrom sykje wittenskippers nei nije technologyen foar de produksje fan biosurfactants basearre op natuerlike baktearjes30,31. Foarútgong yn sa'n ûndersyk toant it belang fan dizze biologyske ferbiningen foar miljeubeskerming32. Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium en dizze baktearjele genera binne goed studearre fertsjintwurdigers23,33.
D'r binne in protte soarten biosurfactants mei in breed oanbod fan tapassingen34. In wichtich foardiel fan dizze ferbiningen is dat guon fan harren antibakteriële, larvicide en insecticide aktiviteit hawwe. Dit betsjut dat se kinne wurde brûkt yn 'e agraryske, gemyske, farmaseutyske en kosmetyske yndustry35,36,37,38. Om't biosurfactants oer it algemien biologysk ôfbrekber en miljeu-geunstich binne, wurde se brûkt yn yntegreare pestbehearprogramma's om gewaaksen te beskermjen39. Sa is basiskennis krigen oer de larvicidale en antitermytaktiviteit fan mikrobiële biosurfactants produsearre troch Enterobacter cloacae SJ2. Wy ûndersochten mortaliteit en histologyske feroaringen by bleatstelling oan ferskate konsintraasjes fan rhamnolipide biosurfactants. Derneist evaluearren wy it breed brûkte Quantitative Structure-Activity (QSAR) kompjûterprogramma Ecological Structure-Activity (ECOSAR) om akute toxiciteit foar mikroalgen, daphnia en fisk te bepalen.
Yn dizze stúdzje, de antitermite aktiviteit (toxicity) fan suvere biosurfactants op ferskate konsintraasjes fariearjend fan 30 nei 50 mg / ml (by 5 mg / ml yntervallen) waard hifke tsjin Yndiaanske termites, O. obesus en fjirde soarten ) Evaluearje. Larven fan instar Cx. Larven fan muggen quinquefasciatus. Biosurfactant LC50 konsintraasjes oer 48 oeren tsjin O. obesus en Cx. C. solanacearum. Mosquito larven waarden identifisearre mei help fan in net-lineêre regression curve fitting metoade. De resultaten lieten sjen dat termitenstjerte tanommen mei tanimmende konsintraasje fan biosurfactant. De resultaten lieten sjen dat de biosurfactant larvicidale aktiviteit hie (figuer 1) en anty-termytaktiviteit (figuer 2), mei 48-oere LC50-wearden (95% CI) fan 26.49 mg / L (25.40 oant 27.57) en 33.43 mg / l (ôfb. 31.09 oan 35.68), respektivelik (Tabel 1). Yn termen fan akute toksisiteit (48 oeren) wurdt de biosurfactant klassifisearre as "skealik" foar de testte organismen. De biosurfactant produsearre yn dizze stúdzje toande poerbêste larvicidale aktiviteit mei 100% mortaliteit binnen 24-48 oeren nei eksposysje.
Berekkenje de LC50 wearde foar larvicide aktiviteit. Netlineêre regression-kromme-oanpassing (solide line) en 95% betrouwensynterval (skaadearre gebiet) foar relative mortaliteit (%).
Berekkenje de LC50-wearde foar anty-termytaktiviteit. Netlineêre regression-kromme-oanpassing (solide line) en 95% betrouwensynterval (skaadearre gebiet) foar relative mortaliteit (%).
Oan 'e ein fan it eksperimint waarden morfologyske feroaringen en anomalies ûnder de mikroskoop waarnommen. Morfologyske feroaringen waarden waarnommen yn 'e kontrôle en behannele groepen by 40x fergrutting. Lykas sjen litten yn figuer 3, groeide beheining barde yn 'e mearderheid fan larven behannele mei biosurfactants. Figuer 3a lit in normale Cx sjen. quinquefasciatus, figuer 3b toant in anomalous Cx. Feroarsaakje fiif nematode larven.
Effekt fan subletale (LC50) doses fan biosurfactants op 'e ûntwikkeling fan Culex quinquefasciatus larven. Ljochtmikroskopyôfbylding (a) fan in normale Cx by 40 × fergrutting. quinquefasciatus (b) Abnormale Cx. Feroarsaakje fiif nematode larven.
Yn 'e hjoeddeiske stúdzje hat histologysk ûndersyk fan behannele larven (Fig. 4) en termiten (Fig. 5) ferskate abnormaliteiten iepenbiere, ynklusyf fermindering fan abdominale gebiet en skea oan spieren, epitheliale lagen en hûd. midgut. Histology die bliken it meganisme fan inhibitory aktiviteit fan de biosurfactant brûkt yn dizze stúdzje.
Histopatology fan normale ûnbehannele 4e ynstar Cx larven. quinquefasciatus larven (kontrôle: (a,b)) en behannele mei biosurfactant (behanneling: (c,d)). Pylken jouwe behannele intestinal epithelium (epi), kearnen (n), en spier (mu). Bar = 50 µm.
Histopatology fan normale ûnbehandele O. obesus (kontrôle: (a, b)) en biosurfactant behannele (behanneling: (c, d)). Pylken jouwe respektivelik intestinal epithelium (epi) en muscle (mu) oan. Bar = 50 µm.
Yn dizze stúdzje waard ECOSAR brûkt om de akute toxiciteit fan rhamnolipide biosurfactant-produkten te foarsizzen foar primêre produsinten (griene algen), primêre konsuminten (wettervlooien) en sekundêre konsuminten (fisk). Dit programma brûkt ferfine kwantitative struktuer-aktiviteit gearstalde modellen om toxiciteit te evaluearjen basearre op molekulêre struktuer. It model brûkt software foar struktueraktiviteit (SAR) om de akute en lange-termyn toxiciteit fan stoffen foar akwatyske soarten te berekkenjen. Spesifyk gearfettet tabel 2 de skatte gemiddelde deadlike konsintraasjes (LC50) en gemiddelde effektive konsintraasjes (EC50) foar ferskate soarten. Fertochte toxiciteit waard yndield yn fjouwer nivo's mei it Globally Harmonized System of Classification and Labeling of Chemicals (Tabel 3).
Kontrôle fan sykten dy't troch fektor oerdroegen wurde, benammen stammen fan muggen en Aedes-muggen. Egyptners, no dreech wurk 40,41,42,43,44,45,46. Hoewol guon gemysk beskikbere pestiziden, lykas pyrethroïden en organofosfaten, wat foardielich binne, foarmje se signifikante risiko's foar minsklike sûnens, ynklusyf diabetes, reproduktive steuringen, neurologyske steuringen, kanker en respiratory diseases. Boppedat kinne dizze ynsekten mei de tiid resistint wurde foar har13,43,48. Sa sille effektive en miljeufreonlike biologyske kontrôlemaatregels in populêrere metoade wurde foar muggenkontrôle49,50. Benelli51 suggerearre dat iere kontrôle fan mosquito-fektors effektiver wêze soe yn stedske gebieten, mar se riede it gebrûk fan larviciden net oan yn plattelân52. Tom et al 53 suggerearre ek dat it kontrolearjen fan muggen op har ûnfoldwaande stadia in feilige en ienfâldige strategy wêze soe, om't se gefoeliger binne foar kontrôle aginten 54 .
Biosurfactantproduksje troch in krêftige stam (Enterobacter cloacae SJ2) liet konsekwint en belofte effektiviteit sjen. Us foarige stúdzje rapportearre dat Enterobacter cloacae SJ2 de produksje fan biosurfactant optimisearret mei fysysk-gemyske parameters26. Neffens harren stúdzje wiene de optimale betingsten foar produksje fan biosurfactant troch in potinsjele E. cloacae-isolaat ynkubaasje foar 36 oeren, agitaasje by 150 rpm, pH 7,5, 37 °C, salinity 1 ppt, 2% glukoaze as koalstofboarne, 1% gist . it ekstrakt waard brûkt as stikstofboarne om 2,61 g/L biosurfactant te krijen. Derneist waarden de biosurfactants karakterisearre mei TLC, FTIR en MALDI-TOF-MS. Dit befêstige dat rhamnolipid in biosurfactant is. Glycolipide biosurfactants binne de meast yntinsyf studearre klasse fan oare soarten biosurfactants55. Se besteane út koalhydraat en lipide dielen, benammen fatty acid keatlingen. Under glycolipids binne de wichtichste fertsjintwurdigers rhamnolipid en sophorolipid56. Rhamnolipiden befetsje twa rhamnose-groepen keppele oan mono- of di-β-hydroxydecanoic acid 57. It gebrûk fan rhamnolipiden yn 'e medyske en farmaseutyske yndustry is goed fêststeld 58 , neist har resinte gebrûk as pestiziden 59 .
De ynteraksje fan 'e biosurfactant mei it hydrofobe gebiet fan' e respiratory sifon lit wetter troch har stomatale holte passe, wêrtroch it kontakt fan 'e larven mei it akwatyske omjouwing fergruttet. De oanwêzigens fan biosurfactants hat ek ynfloed op de trachea, wêrfan de lingte ticht by it oerflak is, wat it makliker makket foar de larven om nei it oerflak te krûpen en te sykheljen. Dêrtroch nimt de oerflakspanning fan wetter ôf. Sûnt de larven kinne net hechtsje oan it oerflak fan it wetter, se falle oan 'e boaiem fan' e tank, disrupting hydrostatic druk, resultearret yn oerstallige enerzjy útjeften en dea troch ferdrinking38,60. Fergelykbere resultaten waarden krigen troch Ghribi61, wêr't in biosurfactant produsearre troch Bacillus subtilis larvicidale aktiviteit eksposearre tsjin Ephestia kuehniella. Lykas de larvicidale aktiviteit fan Cx. Das en Mukherjee23 ek beoardiele it effekt fan cyclic lipopeptides op quinquefasciatus larven.
De resultaten fan dizze stúdzje betreffen de larvicidale aktiviteit fan rhamnolipide biosurfactants tsjin Cx. Deadzjen fan quinquefasciatus-muggen is yn oerienstimming mei earder publisearre resultaten. Bygelyks, surfactin-basearre biosurfactants produsearre troch ferskate baktearjes fan it skaai Bacillus wurde brûkt. en Pseudomonas spp. Guon iere rapporten64,65,66 melde larval-deadzjende aktiviteit fan lipopeptide biosurfactants út Bacillus subtilis23. Deepali et al. 63 fûn dat rhamnolipide biosurfactant isolearre fan Stenotropomonas maltophilia in krêftige larvicidale aktiviteit hie by in konsintraasje fan 10 mg / L. Silva et al. 67 rapportearre de larvicidale aktiviteit fan rhamnolipide biosurfactant tsjin Ae by in konsintraasje fan 1 g / L. Aedes aegypti. Kanakdande et al. 68 rapportearre dat lipopeptide biosurfactants produsearre troch Bacillus subtilis feroarsake totale mortaliteit yn Culex larven en termiten mei de lipofile fraksje fan Eucalyptus. Likewise, Masendra et al. 69 rapportearre arbeider ant (Cryptotermes cynocephalus Light.) Mortaliteit fan 61,7% yn de lipofile n -hexane en EtOAc fraksjes fan E. crude extract.
Parthipan et al 70 melde it insecticide gebrûk fan lipopeptide biosurfactants produsearre troch Bacillus subtilis A1 en Pseudomonas stutzeri NA3 tsjin Anopheles Stephensi, in fektor fan de malaria parasyt Plasmodium. Se observearre dat larven en poppen langer oerlibben, koartere oviposysjeperioaden hienen, sterile wiene en koartere libbensdoer hienen as se behannele waarden mei ferskate konsintraasjes fan biosurfactants. De waarnommen LC50-wearden fan B. subtilis biosurfactant A1 wiene respektivelik 3.58, 4.92, 5.37, 7.10 en 7.99 mg/L foar ferskate larve steaten (dws larven I, II, III, IV en poadiumpuppies). Yn ferliking wiene biosurfactants foar larvalstadia I-IV en pupalstadia fan Pseudomonas stutzeri NA3 respektivelik 2.61, 3.68, 4.48, 5.55 en 6.99 mg/L. De fertrage fenology fan oerlibjende larven en poppen wurdt nei alle gedachten it gefolch fan signifikante fysiologyske en metabolike steuringen feroarsake troch insecticide behannelingen71.
Wickerhamomyces anomalus stam CCMA 0358 produseart in biosurfactant mei 100% larvicidale aktiviteit tsjin Aedes-muggen. aegypti 24-oere ynterval 38 wie heger as rapportearre troch Silva et al. In biosurfactant produsearre út Pseudomonas aeruginosa mei help fan sinneblom oalje as koalstof boarne is oantoand te deadzjen 100% fan larven binnen 48 oeren 67 . Abinaya et al.72 en Pradhan et al.73 demonstrearre ek de larvicidale of insecticide effekten fan surfaktanten produsearre troch ferskate isolaten fan 'e genus Bacillus. In earder publisearre stúdzje troch Senthil-Nathan et al. fûn dat 100% fan muggenlarven bleatsteld oan plantlagunes wierskynlik stjerre. 74.
It beoardieljen fan de subletale effekten fan ynsektiziden op ynsektebiology is kritysk foar yntegreare pestbehearprogramma's, om't subletale doses/konsintraasjes gjin ynsekten deadzje, mar ynsektenpopulaasjes yn takomstige generaasjes kinne ferminderje troch biologyske skaaimerken te fersteuren10. Siqueira et al 75 observearre folsleine larvicidale aktiviteit (100% mortaliteit) fan rhamnolipide biosurfactant (300 mg / ml) doe't testen op ferskate konsintraasjes fariearjend fan 50 oant 300 mg / ml. Larvalstadium fan Aedes aegypti-stammen. Se analysearren de effekten fan tiid oant dea en subletale konsintraasjes op larval oerlibjen en swimaktiviteit. Dêrnjonken observearren se in fermindering fan swimsnelheid nei 24-48 oeren bleatstelling oan subletale konsintraasjes fan biosurfactant (bygelyks 50 mg / ml en 100 mg / ml). Giffen dy't belofte subletale rollen hawwe, wurde nei alle gedachten effektiver yn it feroarsaakjen fan meardere skea oan bleatstelde pesten76.
Histologyske observaasjes fan ús resultaten jouwe oan dat biosurfactants produsearre troch Enterobacter cloacae SJ2 signifikant feroarje de weefsels fan mosquito (Cx. quinquefasciatus) en termite (O. obesus) larven. Soartgelikense anomalies waarden feroarsake troch tariedings fan basil oalje yn An. gambiaes.s en An. arabica waarden beskreaun troch Ochola77. Kamaraj et al.78 beskreau ek deselde morfologyske abnormaliteiten yn An. Stephanie's larven waarden bleatsteld oan gouden nanopartikels. Vasantha-Srinivasan et al.79 rapportearre ek dat herder syn beurs essensjele oalje slim skansearre de keamer en epithelial lagen fan Aedes albopictus. Aedes aegypti. Raghavendran et al rapportearre dat mosquito larven waarden behannele mei 500 mg / ml mycelial extract fan in lokale Penicillium fungus. Ae litte slimme histologyske skea sjen. aegypti en Cx. Mortality rate 80. Earder, Abinaya et al. Fjirde ynstar larven fan An waarden studearre. Stephensi en Ae. aegypti fûn tal fan histologyske feroarings yn Aedes aegypti behannele mei B. licheniformis exopolysaccharides, ynklusyf gastric cecum, muscle atrophy, skea en disorganisaasje fan nerve cord ganglia72. Neffens Raghavendran et al., nei behanneling mei P. daleae mycelial extract, de midgut sellen fan hifke muggen (4e instar larvae) toande swelling fan de intestinal lumen, in ôfnimming fan intercellular ynhâld, en nukleêre degeneraasje81. Deselde histologyske feroaringen waarden waarnommen yn muggenlarven behannele mei echinacea-blêdekstrakt, wat oanjout op it insecticide potensjeel fan 'e behannele ferbiningen50.
It gebrûk fan ECOSAR-software hat ynternasjonale erkenning krigen82. Aktueel ûndersyk suggerearret dat de akute toxicity fan ECOSAR biosurfactants oan mikroalgen (C. vulgaris), fisk en wetter vlooien (D. magna) falt binnen de "toxicity" kategory definiearre troch de Feriene Naasjes83. It ECOSAR-ekotoksisiteitsmodel brûkt SAR en QSAR om acute en lange-termyn toxiciteit fan stoffen te foarsizzen en wurdt faak brûkt om de toxicity fan organyske pollutants te foarsizzen82,84.
Paraformaldehyde, natriumfosfaatbuffer (pH 7.4) en alle oare gemikaliën dy't yn dizze stúdzje brûkt wurde waarden kocht fan HiMedia Laboratories, Yndia.
Produksje fan biosurfactant waard útfierd yn 500 ml Erlenmeyer-flessen dy't 200 ml sterile Bushnell Haas-medium befetsje oanfolle mei 1% rûge oalje as de ienige koalstofboarne. In foarkultuer fan Enterobacter cloacae SJ2 (1.4 × 104 CFU / ml) waard ynokulearre en yn kultuer brocht op in orbital shaker by 37 ° C, 200 rpm foar 7 dagen. Nei de ynkubaasjeperioade waard de biosurfactant ekstrahearre troch it kultuermedium by 3400 × g foar 20 minuten by 4 ° C te sintrifuzjen en de resultearjende supernatant waard brûkt foar screeningdoelen. De optimisaasjeprosedueres en karakterisaasje fan biosurfactants waarden oannommen út ús eardere stúdzje26.
Culex quinquefasciatus larven waarden krigen fan it Centre for Advanced Study in Marine Biology (CAS), Palanchipetai, Tamil Nadu (Yndia). Larven waarden grutbrocht yn plestik konteners fol mei deionisearre wetter by 27 ± 2 ° C en in fotoperioade fan 12:12 (ljocht: tsjuster). Mosquito larven waarden fiede in 10% glukoaze oplossing.
Culex quinquefasciatus-larven binne fûn yn iepen en ûnbeskerme septyske tanks. Brûk standert klassifikaasjerjochtlinen om larven te identifisearjen en te kultivearjen yn it laboratoarium85. Larvicidale proeven waarden útfierd yn oerienstimming mei de oanbefellingen fan 'e Wrâldsûnensorganisaasje 86 . SH. Fjirde instar larven fan quinquefasciatus waarden sammele yn sletten buizen yn groepen fan 25 ml en 50 ml mei in luchtspalte fan twa-tredde fan har kapasiteit. Biosurfactant (0-50 mg / ml) waard tafoege oan elke buis yndividueel en opslein by 25 ° C. De kontrôle buis brûkt allinnich destillearre wetter (50 ml). Deade larven waarden beskôge as dejingen dy't gjin tekens fan swimmen sjen litte yn 'e ynkubaasjeperioade (12-48 oeren) 87 . Berekkenje it persintaazje larval mortaliteit mei help fan de fergeliking. (1)88.
De famylje Odontotermitidae omfettet de Yndiaaske termyt Odontotermes obesus, fûn yn rottende stammen op 'e Agricultural Campus (Annamalai University, Yndia). Test dizze biosurfactant (0-50 mg / ml) mei normale prosedueres om te bepalen as it skealik is. Nei it droegjen yn laminêre luchtstream foar 30 min, waard elke strip fan Whatman-papier bedekt mei biosurfactant by in konsintraasje fan 30, 40, of 50 mg / ml. Pre-coated en uncoated papier strips waarden hifke en fergelike yn it sintrum fan in petrischaal. Elk petryskaal befettet sa'n tritich aktive termiten O. obesus. Kontrôle- en testtermiten krigen wiet papier as fiedingsboarne. Alle platen waarden hâlden by keamertemperatuer yn 'e ynkubaasjeperioade. Termiten stoaren nei 12, 24, 36 en 48 oeren89,90. Fergeliking 1 waard doe brûkt om it persintaazje termitemortaliteit te skatten by ferskate biosurfactant-konsintraasjes. (2).
De samples waarden op iis hâlden en yn mikrotubes ynpakt mei 100 ml 0.1 M natriumfosfaatbuffer (pH 7.4) en stjoerd nei it Central Aquaculture Pathology Laboratory (CAPL) fan it Rajiv Gandhi Center for Aquaculture (RGCA). Histology Laboratory, Sirkali, Mayiladuthurai. District, Tamil Nadu, Yndia foar fierdere analyze. Samples waarden fuortendaliks fêstmakke yn 4% paraformaldehyde by 37 ° C foar 48 oeren.
Nei de fixaasjefaze waard it materiaal trije kear wosken mei 0,1 M natriumfosfaatbuffer (pH 7,4), stapsgewoan dehydratisearre yn ethanol en 7 dagen yn LEICA-hars weed. De stof wurdt dan pleatst yn in plestik mal fol mei hars en polymerizer, en dan pleatst yn in oven ferwaarme oant 37 ° C oant it blok befettet de stof is folslein polymerized.
Nei polymerisaasje waarden de blokken knipt mei in LEICA RM2235-mikrotoom (Rankin Biomedical Corporation 10.399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48.350, USA) oant in dikte fan 3 mm. De seksjes binne groepearre op dia's, mei seis seksjes per dia. De dia's waarden droech by keamertemperatuer, dan kleurde mei hematoxylin foar 7 min en wosken mei rinnend wetter foar 4 min. Dêrneist tapasse de eosin-oplossing op 'e hûd foar 5 minuten en spielje mei rinnend wetter foar 5 minuten.
Akute toxiciteit waard foarsein mei help fan wetterorganismen út ferskate tropyske nivo's: 96-oere fisk LC50, 48-oere D. magna LC50, en 96-oere griene algen EC50. De toxiciteit fan rhamnolipide biosurfactants foar fisk en griene algen waard beoardiele mei ECOSAR software ferzje 2.2 foar Windows ûntwikkele troch de US Environmental Protection Agency. (Online beskikber op https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Alle tests foar larvicidale en antitermytaktiviteit waarden yn triplikaat útfierd. Net-lineêre regression (log fan dose-antwurdfariabelen) fan larval- en termitenstjertegegevens waard útfierd om mediaan deadlike konsintraasje (LC50) te berekkenjen mei 95% betrouwensynterval, en konsintraasje-antwurdkurven waarden generearre mei Prism® (ferzje 8.0, GraphPad Software) Inc., Feriene Steaten) 84, 91.
De hjoeddeiske stúdzje ûntbleatet it potensjeel fan mikrobiële biosurfactants produsearre troch Enterobacter cloacae SJ2 as mosquito larvicidale en antitermite aginten, en dit wurk sil bydrage oan in better begryp fan de meganismen fan larvicidale en antitermite aksje. Histologyske stúdzjes fan larven behannele mei biosurfactants toande skea oan it spijsvertering traktaat, midgut, cerebral cortex en hyperplasia fan intestinal epithelial sellen. Resultaten: Toxikologyske evaluaasje fan 'e antitermite en larvicidale aktiviteit fan rhamnolipide biosurfactant produsearre troch Enterobacter cloacae SJ2 die bliken dat dit isolaat in potinsjele biopestiside is foar de kontrôle fan fektor-borne sykten fan muggen (Cx quinquefasciatus) en termen (Obesusites). D'r is needsaak om de ûnderlizzende miljeu-toxiciteit fan biosurfactants en har potensjele miljeu-ynfloeden te begripen. Dizze stúdzje jout in wittenskiplike basis foar it beoardieljen fan it miljeurisiko fan biosurfactants.
Post tiid: Apr-09-2024