It wiidfersprate gebrûk fan syntetyske bestridingsmiddels hat ta in protte problemen laat, ynklusyf it ûntstean fan resistente organismen, miljeu-degradaasje en skea oan 'e minsklike sûnens. Dêrom binne nije mikrobiëlebestridingsmiddelsdy't feilich binne foar minsklike sûnens en it miljeu binne driuwend nedich. Yn dizze stúdzje waard rhamnolipide biosurfaktant produsearre troch Enterobacter cloacae SJ2 brûkt om toksisiteit te evaluearjen foar muggen- (Culex quinquefasciatus) en termiten- (Odontotermes obesus) larven. De resultaten lieten sjen dat der in dosisôfhinklike mortaliteit wie tusken behannelingen. De LC50 (50% letale konsintraasje) wearde nei 48 oeren foar termiten- en muggenlarven biosurfaktanten waard bepaald mei in net-lineare regresjekromme-oanpassingsmetoade. De resultaten lieten sjen dat de 48-oere LC50-wearden (95% fertrouwensynterval) fan larviside en antytermytaktiviteit fan 'e biosurfaktant respektivelik 26,49 mg/L (berik 25,40 oant 27,57) en 33,43 mg/L (berik 31,09 oant 35,68) wiene. Neffens histopatologysk ûndersyk feroarsake behanneling mei biosurfaktanten swiere skea oan organelweefsels fan larven en termiten. De resultaten fan dizze stúdzje jouwe oan dat de mikrobiële biosurfaktant produsearre troch Enterobacter cloacae SJ2 in poerbêst en potinsjeel effektyf ark is foar Cx-kontrôle. quinquefasciatus en O. obesus.
Tropyske lannen hawwe te krijen mei in grut oantal troch muggen oerdroegen sykten1. De relevânsje fan troch muggen oerdroegen sykten is wiidferspraat. Mear as 400.000 minsken stjerre elk jier oan malaria, en guon grutte stêden hawwe te krijen mei epidemyen fan serieuze sykten lykas dengue, giele koarts, chikungunya en Zika.2 Troch fektoren oerdroegen sykten wurde wrâldwiid assosjeare mei ien op de seis ynfeksjes, wêrby't muggen de wichtichste gefallen feroarsaakje3,4. Culex, Anopheles en Aedes binne de trije muggengeslachten dy't it meast assosjeare wurde mei sykteoerdracht5. De prevalinsje fan denguekoarts, in ynfeksje dy't oerdroegen wurdt troch de Aedes aegypti-mug, is de ôfrûne tsien jier tanommen en foarmet in wichtige bedriging foar de folkssûnens4,7,8. Neffens de Wrâldsûnensorganisaasje (WHO) rint mear as 40% fan 'e wrâldbefolking risiko op denguekoarts, mei 50-100 miljoen nije gefallen dy't jierliks foarkomme yn mear as 100 lannen9,10,11. Denguekoarts is in grut probleem foar de folkssûnens wurden, om't de ynsidinsje wrâldwiid tanommen is12,13,14. Anopheles gambiae, algemien bekend as de Afrikaanske Anopheles-mug, is de wichtichste drager fan minsklike malaria yn tropyske en subtropyske regio's15. It West-Nylfirus, Sint-Louis-encefalitis, Japanske encefalitis, en firale ynfeksjes fan hynders en fûgels wurde oerbrocht troch Culex-muggen, faak gewoane hûsmuggen neamd. Derneist binne se ek dragers fan baktearjele en parasitêre sykten16. Der binne mear as 3.000 soarten termiten yn 'e wrâld, en se besteane al mear as 150 miljoen jier17. De measte pleagen libje yn 'e boaiem en fiede har mei hout en houtprodukten dy't cellulose befetsje. De Yndiaaske termyt Odontotermes obesus is in wichtige pleach dy't slimme skea feroarsaket oan wichtige gewaaksen en plantaazjebeammen18. Yn lânbougebieten kinne termytebesmettingen yn ferskate stadia enoarme ekonomyske skea feroarsaakje oan ferskate gewaaksen, beamsoarten en boumaterialen. Termiten kinne ek sûnensproblemen feroarsaakje by minsken19.
De kwestje fan ferset tsjin mikroorganismen en pleagen yn 'e hjoeddeiske farmaseutyske en lânboukundige fjilden is kompleks20,21. Dêrom moatte beide bedriuwen sykje nei nije kosten-effektive antimikrobiële middels en feilige biopesticiden. Syntetyske pestiziden binne no beskikber en it is oantoand dat se ynfeksjeus binne en net-doelwitte foardielige ynsekten ôfstjitte22. Yn 'e lêste jierren is it ûndersyk nei biosurfaktanten útwreide fanwegen har tapassing yn ferskate yndustryen. Biosurfaktanten binne tige nuttich en essensjeel yn lânbou, boaiemsanering, petroleumwinning, baktearjes en ynsektenferwidering, en itenferwurking23,24. Biosurfaktanten of mikrobiële surfactanten binne biosurfaktantgemikaliën produsearre troch mikroorganismen lykas baktearjes, gisten en skimmels yn kusthabitats en oalje-fersmoarge gebieten25,26. Gemysk ôflaat surfactants en biosurfaktanten binne twa soarten dy't direkt út 'e natuerlike omjouwing wurde krigen27. Ferskate biosurfaktanten wurde krigen út marinehabitats28,29. Dêrom binne wittenskippers op syk nei nije technologyen foar de produksje fan biosurfaktanten basearre op natuerlike baktearjes30,31. Foarútgong yn sok ûndersyk lit it belang fan dizze biologyske ferbiningen foar miljeubeskerming sjen32. Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium en dizze baktearjeslachten binne goed bestudearre fertsjintwurdigers23,33.
Der binne in soad soarten biosurfaktanten mei in breed skala oan tapassingen34. In wichtich foardiel fan dizze ferbiningen is dat guon fan harren antibakteriële, larviside en ynsekticide aktiviteit hawwe. Dit betsjut dat se brûkt wurde kinne yn 'e lânbou-, gemyske, farmaseutyske en kosmetyske yndustry35,36,37,38. Omdat biosurfaktanten oer it algemien biologysk ôfbrekber en miljeufreonlik binne, wurde se brûkt yn yntegreare pestbehearprogramma's om gewaaksen te beskermjen39. Sa is basiskennis krigen oer de larviside en antytermytaktiviteit fan mikrobiële biosurfaktanten produsearre troch Enterobacter cloacae SJ2. Wy hawwe mortaliteit en histologyske feroarings ûndersocht by bleatstelling oan ferskate konsintraasjes fan rhamnolipide biosurfaktanten. Derneist hawwe wy it breed brûkte Quantitative Structure-Activity (QSAR) kompjûterprogramma Ecological Structure-Activity (ECOSAR) evaluearre om akute toksisiteit foar mikroalgen, daphnia en fisken te bepalen.
Yn dizze stúdzje waard de antytermytaktiviteit (toksisiteit) fan suvere biosurfaktanten by ferskate konsintraasjes fariearjend fan 30 oant 50 mg/ml (mei yntervallen fan 5 mg/ml) test tsjin Yndiaanske termiten, O. obesus en fjirde soarte). Evaluearje. Larven fan instar Cx. Larven fan muggen quinquefasciatus. Biosurfaktant LC50-konsintraasjes oer 48 oeren tsjin O. obesus en Cx. C. solanacearum. Muggelarven waarden identifisearre mei in net-lineare regresje-kromme-oanpassingsmetoade. De resultaten lieten sjen dat termytesterfte tanommen mei tanimmende biosurfaktantkonsintraasje. De resultaten lieten sjen dat de biosurfaktant larviside aktiviteit hie (figuer 1) en anty-termiteaktiviteit (figuer 2), mei 48-oere LC50-wearden (95% CI) fan 26,49 mg/L (25,40 oant 27,57) en 33,43 mg/l (figuer 31,09 oant 35,68), respektivelik (tabel 1). Yn termen fan akute toksisiteit (48 oeren) wurdt de biosurfaktant klassifisearre as "skealik" foar de testorganismen. De biosurfaktant produsearre yn dizze stúdzje liet poerbêste larviside aktiviteit sjen mei 100% mortaliteit binnen 24-48 oeren nei bleatstelling.
Berekenje de LC50-wearde foar larviside aktiviteit. Net-lineare regresjekrommepassing (fêste line) en 95% fertrouwensynterval (skaadgebiet) foar relative mortaliteit (%).
Berekenje de LC50-wearde foar anty-termytaktiviteit. Net-lineare regresjekrommepassing (fêste line) en 95% fertrouwensynterval (skaadgebiet) foar relative mortaliteit (%).
Oan 'e ein fan it eksperimint waarden morfologyske feroarings en anomalieën ûnder de mikroskoop waarnommen. Morfologyske feroarings waarden waarnommen yn 'e kontrôle- en behannele groepen by 40x fergrutting. Lykas te sjen is yn figuer 3, kaam groeifermindering foar by de mearderheid fan 'e larven dy't behannele waarden mei biosurfaktanten. Figuer 3a lit in normale Cx. quinquefasciatus sjen, figuer 3b lit in anomale Cx. Feroarsaket fiif nematodelarven sjen.
Effekt fan subletale (LC50) doses fan biosurfaktanten op 'e ûntwikkeling fan Culex quinquefasciatus-larven. Ljochtmikroskopieôfbylding (a) fan in normale Cx by 40× fergrutting. quinquefasciatus (b) Abnormale Cx. Feroarsaket fiif nematodelarven.
Yn 'e hjoeddeiske stúdzje liet histologysk ûndersyk fan behannele larven (Fig. 4) en termiten (Fig. 5) ferskate abnormaliteiten sjen, ynklusyf fermindering fan it abdominale gebiet en skea oan spieren, epitheallagen en hûd yn 'e middendarm. Histology liet it meganisme fan remmende aktiviteit sjen fan 'e biosurfaktant dy't yn dizze stúdzje brûkt waard.
Histopatology fan normale, net behannele 4e instar Cx-larven. quinquefasciatus-larven (kontrôle: (a, b)) en behannele mei biosurfaktant (behanneling: (c, d)). Pylken jouwe behannele intestinale epithelium (epi), kearnen (n) en spier (mu) oan. Balke = 50 µm.
Histopatology fan normale net-behannele O. obesus (kontrôle: (a, b)) en behannele mei biosurfaktant (behanneling: (c, d)). Pylken jouwe respektivelik intestinale epithelium (epi) en spier (mu) oan. Balke = 50 µm.
Yn dizze stúdzje waard ECOSAR brûkt om de akute toksisiteit fan rhamnolipide biosurfaktantprodukten te foarsizzen foar primêre produsinten (griene algen), primêre konsuminten (wetterfleisen) en sekundêre konsuminten (fisken). Dit programma brûkt ferfine kwantitative struktuer-aktiviteitsferbiningsmodellen om toksisiteit te evaluearjen op basis fan molekulêre struktuer. It model brûkt struktuer-aktiviteitssoftware (SAR) om de akute en lange-termyn toksisiteit fan stoffen foar wettersoarten te berekkenjen. Spesifyk jout tabel 2 in gearfetting fan 'e skatte gemiddelde deadlike konsintraasjes (LC50) en gemiddelde effektive konsintraasjes (EC50) foar ferskate soarten. Fertochte toksisiteit waard yn fjouwer nivo's kategorisearre mei it Globally Harmonized System of Classification and Labeling of Chemicals (Tabel 3).
Kontrôle fan troch fektoren oerdroegen sykten, benammen stammen fan muggen en Aedes-muggen. Egyptenaren, no lestich wurk 40,41,42,43,44,45,46. Hoewol guon gemysk beskikbere bestridingsmiddels, lykas pyrethroïden en organofosfaten, wat foardielich binne, foarmje se wichtige risiko's foar de minsklike sûnens, ynklusyf diabetes, reproduktive steurnissen, neurologyske steurnissen, kanker en sykten fan 'e luchtwegen. Boppedat kinne dizze ynsekten mei de tiid resistint wurde tsjin har13,43,48. Sa sille effektive en miljeufreonlike biologyske kontrôlemaatregels in populêrere metoade wurde foar muggenkontrôle49,50. Benelli51 suggerearre dat iere kontrôle fan muggenfektoren effektiver soe wêze yn stedske gebieten, mar se advisearren it gebrûk fan larviciden yn plattelânsgebieten net52. Tom et al53 suggerearren ek dat it kontrolearjen fan muggen yn har ûnrype stadia in feilige en ienfâldige strategy soe wêze, om't se gefoeliger binne foar kontrôlemiddels 54.
Biosurfaktantproduksje troch in krêftige stam (Enterobacter cloacae SJ2) liet konsekwinte en beloftefolle effektiviteit sjen. Us eardere stúdzje melde dat Enterobacter cloacae SJ2 de produksje fan biosurfaktanten optimalisearret mei help fan fysyk-gemyske parameters26. Neffens harren stúdzje wiene de optimale omstannichheden foar biosurfaktantproduksje troch in potinsjeel E. cloacae-isolaat ynkubaasje foar 36 oeren, skodzjen by 150 rpm, pH 7,5, 37 °C, sâltgehalte 1 ppt, 2% glukose as koalstofboarne, 1% gist. It ekstrakt waard brûkt as in stikstofboarne om 2,61 g/L biosurfaktant te krijen. Derneist waarden de biosurfaktanten karakterisearre mei TLC, FTIR en MALDI-TOF-MS. Dit befêstige dat rhamnolipide in biosurfaktant is. Glykolipide-biosurfaktanten binne de meast yntinsyf bestudearre klasse fan oare soarten biosurfaktanten55. Se besteane út koalhydraat- en lipidedielen, benammen fetsoerketens. Under glykolipiden binne de wichtichste fertsjintwurdigers rhamnolipide en soforolipide56. Rhamnolipiden befetsje twa rhamnose-groepen dy't keppele binne oan mono- of di-β-hydroxydecaansoer 57. It gebrûk fan rhamnolipiden yn 'e medyske en farmaseutyske yndustry is goed fêstige 58, neist har resinte gebrûk as bestridingsmiddels 59.
De ynteraksje fan 'e biosurfaktant mei it hydrofobe gebiet fan 'e respiratoire sifon lit wetter troch syn stomatale holte gean, wêrtroch it kontakt fan 'e larven mei de wetterige omjouwing fergruttet. De oanwêzigens fan biosurfaktanten beynfloedet ek de trachea, waans lingte ticht by it oerflak is, wat it makliker makket foar de larven om nei it oerflak te krûpen en te sykheljen. As gefolch nimt de oerflakspanning fan wetter ôf. Om't de larven har net oan it oerflak fan it wetter kinne hechtsje, falle se nei de boaiem fan 'e tank, wêrtroch't de hydrostatyske druk fersteurd wurdt, wat resulteart yn oermjittich enerzjyferbrûk en dea troch ferdrinking38,60. Fergelykbere resultaten waarden krigen troch Ghribi61, wêr't in biosurfaktant produsearre troch Bacillus subtilis larviside aktiviteit toande tsjin Ephestia kuehniella. Op deselde wize beoardiele de larviside aktiviteit fan Cx. Das en Mukherjee23 ek it effekt fan sykliske lipopeptiden op quinquefasciatus-larven.
De resultaten fan dizze stúdzje hawwe betrekking op de larviside aktiviteit fan rhamnolipide biosurfaktanten tsjin Cx. It deadzjen fan quinquefasciatus-muggen komt oerien mei earder publisearre resultaten. Bygelyks, surfactine-basearre biosurfaktanten produsearre troch ferskate baktearjes fan it skaai Bacillus wurde brûkt. en Pseudomonas spp. Guon iere rapporten64,65,66 rapportearren larvale-deadende aktiviteit fan lipopeptide biosurfaktanten fan Bacillus subtilis23. Deepali et al. 63 fûnen dat rhamnolipide biosurfaktant isolearre fan Stenotropomonas maltophilia krêftige larviside aktiviteit hie by in konsintraasje fan 10 mg/L. Silva et al. 67 rapportearren de larviside aktiviteit fan rhamnolipide biosurfaktant tsjin Ae by in konsintraasje fan 1 g/L. Aedes aegypti. Kanakdande et al. 68 rapportearren dat lipopeptide-biosurfaktanten produsearre troch Bacillus subtilis in algemiene mortaliteit feroarsaken yn Culex-larven en termiten mei de lipofile fraksje fan Eucalyptus. Op deselde wize rapportearren Masendra et al. 69 in mortaliteit fan 61,7% fan 'e arbeidermier (Cryptotermes cynocephalus Light.) yn 'e lipofile n-hexaan- en EtOAc-fraksjes fan E. rûge ekstrakt.
Parthipan et al 70 rapportearren it ynsektiside gebrûk fan lipopeptide biosurfaktanten produsearre troch Bacillus subtilis A1 en Pseudomonas stutzeri NA3 tsjin Anopheles Stephensi, in fektor fan 'e malariaparasyt Plasmodium. Se observearren dat larven en poppen langer oerlibben, koartere oviposysjeperioaden hienen, steryl wiene en koartere libbensdoer hienen as se behannele waarden mei ferskillende konsintraasjes fan biosurfaktanten. De waarnommen LC50-wearden fan B. subtilis biosurfaktant A1 wiene respektivelik 3,58, 4,92, 5,37, 7,10 en 7,99 mg/L foar ferskillende larvale tastannen (d.w.s. larven I, II, III, IV en stadiumpoppen). Yn ferliking wiene biosurfaktanten foar larvale stadia I-IV en pupastadia fan Pseudomonas stutzeri NA3 respektivelik 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 en 6,99 mg/L. De fertrage fenology fan oerlibjende larven en poppen wurdt tocht it gefolch te wêzen fan wichtige fysiologyske en metabolike steurnissen feroarsake troch ynsektizidbehannelingen71.
Wickerhamomyces anomalus-stam CCMA 0358 produseart in biosurfaktant mei 100% larviside aktiviteit tsjin Aedes-muggen. It ynterval fan 24 oeren fan aegypti 38 wie heger as rapportearre troch Silva et al. In biosurfaktant produsearre út Pseudomonas aeruginosa mei sinneblomoalje as koalstofboarne is oantoand om 100% fan 'e larven binnen 48 oeren te deadzjen 67. Abinaya et al.72 en Pradhan et al.73 demonstrearren ek de larviside of ynsektiside effekten fan surfactants produsearre troch ferskate isolaten fan it skaai Bacillus. In earder publisearre stúdzje fan Senthil-Nathan et al. fûn dat 100% fan 'e muggelarven dy't bleatsteld waarden oan plantelagunes wierskynlik soene stjerre. 74.
It beoardieljen fan 'e subletale effekten fan ynsektisiden op ynsektenbiology is kritysk foar yntegreare pestbehearprogramma's, om't subletale doses/konsintraasjes gjin ynsekten deadzje, mar ynsektenpopulaasjes yn takomstige generaasjes kinne ferminderje troch biologyske skaaimerken te fersteuren10. Siqueira et al75 observearren folsleine larviside aktiviteit (100% mortaliteit) fan rhamnolipide biosurfaktant (300 mg/ml) by testen by ferskate konsintraasjes fariearjend fan 50 oant 300 mg/ml. Larvale stadium fan Aedes aegypti-stammen. Se analysearren de effekten fan tiid oant dea en subletale konsintraasjes op larvale oerlibjen en swimaktiviteit. Derneist observearren se in ôfname yn swimsnelheid nei 24-48 oeren bleatstelling oan subletale konsintraasjes fan biosurfaktant (bygelyks 50 mg/ml en 100 mg/ml). Gifstoffen dy't beloftefolle subletale rollen hawwe, wurde tocht effektiver te wêzen yn it feroarsaakjen fan meardere skea oan bleatstelde pleagen76.
Histologyske observaasjes fan ús resultaten jouwe oan dat biosurfaktanten produsearre troch Enterobacter cloacae SJ2 it weefsel fan mugge- (Cx. quinquefasciatus) en termytelarven (O. obesus) signifikant feroarje. Ferlykbere anomalieën waarden feroarsake troch tariedingen fan basilykoalje yn An. gambiaes.s en An. arabica waarden beskreaun troch Ochola77. Kamaraj et al.78 beskreaune ek deselde morfologyske abnormaliteiten yn An. Stephanie's larven waarden bleatsteld oan gouden nanopartikels. Vasantha-Srinivasan et al.79 rapporteare ek dat essensjele oalje fan hoederstas de keamer- en epitheellagen fan Aedes albopictus slim skansearre. Aedes aegypti. Raghavendran et al rapporteare dat muggelarven behannele waarden mei 500 mg/ml myceliumekstrakt fan in lokale Penicillium-skimmel. Ae litte slimme histologyske skea sjen. aegypti en Cx. Sterftesifer 80. Earder, Abinaya et al. Fjirde stadium larven fan An waarden bestudearre. Stephensi en Ae. aegypti fûnen ferskate histologyske feroarings yn Aedes aegypti behannele mei B. licheniformis exopolysacchariden, ynklusyf maag-cecum, spieratrofy, skea en desorganisaasje fan senuwsnoerganglia72. Neffens Raghavendran et al. lieten de middendarmsellen fan testte muggen (4e instarlarven) nei behanneling mei P. daleae myceliumekstrakt swelling fan it darmlumen, in ôfname fan yntersellulêre ynhâld en kearndegeneraasje81 sjen. Deselde histologyske feroarings waarden waarnommen yn muggelarven behannele mei echinacea-blêdekstrakt, wat de ynsektiside potinsje fan 'e behannele ferbiningen50 oanjout.
It gebrûk fan ECOSAR-software hat ynternasjonale erkenning krigen82. Hjoeddeistich ûndersyk suggerearret dat de akute toksisiteit fan ECOSAR-biosurfaktanten foar mikroalgen (C. vulgaris), fisken en wetterfleisen (D. magna) falt ûnder de kategory "toksisiteit" definieare troch de Feriene Naasjes83. It ECOSAR-ekotoksisiteitsmodel brûkt SAR en QSAR om akute en lange-termyn toksisiteit fan stoffen te foarsizzen en wurdt faak brûkt om de toksisiteit fan organyske fersmoargjende stoffen te foarsizzen82,84.
Paraformaldehyde, natriumfosfaatbuffer (pH 7.4) en alle oare gemikaliën dy't yn dizze stúdzje brûkt binne, waarden kocht fan HiMedia Laboratories, Yndia.
De produksje fan biosurfaktanten waard útfierd yn Erlenmeyer-kolven fan 500 mL mei 200 mL steryl Bushnell Haas-medium oanfolle mei 1% rûge oalje as ienige koalstofboarne. In foarkultuer fan Enterobacter cloacae SJ2 (1,4 × 104 CFU/ml) waard ynintingd en kultivearre op in orbitale shaker by 37 °C, 200 rpm foar 7 dagen. Nei de ynkubaasjeperioade waard de biosurfaktant ekstrahearre troch it kultuermedium te sintrifugearjen by 3400 × g foar 20 minuten by 4 °C en de resultearjende supernatant waard brûkt foar screeningdoelen. De optimalisaasjeprosedueres en karakterisaasje fan biosurfaktanten waarden oernommen út ús eardere stúdzje26.
Culex quinquefasciatus-larven waarden krigen fan it Center for Advanced Study in Marine Biology (CAS), Palanchipetai, Tamil Nadu (Yndia). De larven waarden grutbrocht yn plestik konteners fol mei deionisearre wetter by 27 ± 2 °C en in fotoperioade fan 12:12 (ljocht:tsjuster). De muggelarven krigen in 10% glukose-oplossing.
Culex quinquefasciatus-larven binne fûn yn iepen en ûnbeskerme septyske tanks. Brûk standert klassifikaasjerjochtlinen om larven yn it laboratoarium te identifisearjen en te kweken85. Larviside proeven waarden útfierd neffens de oanbefellings fan 'e Wrâldsûnensorganisaasje86. SH. Fjirde instarlarven fan quinquefasciatus waarden sammele yn sletten buizen yn groepen fan 25 ml en 50 ml mei in loftspleet fan twa tredde fan har kapasiteit. Biosurfaktant (0–50 mg/ml) waard yndividueel oan elke buis tafoege en opslein by 25 °C. De kontrôlebuis brûkte allinich destillearre wetter (50 ml). Deade larven waarden beskôge as dyjingen dy't gjin tekens fan swimmen lieten sjen tidens de ynkubaasjeperioade (12–48 oeren)87. Berekkene it persintaazje larvale mortaliteit mei de fergeliking. (1)88.
De famylje Odontotermitidae omfettet de Yndiaaske termyt Odontotermes obesus, fûn yn rottende stammen op 'e Lânboukampus (Annamalai Universiteit, Yndia). Test dizze biosurfaktant (0–50 mg/ml) mei normale prosedueres om te bepalen oft it skealik is. Nei it droegjen yn laminêre loftstream foar 30 minuten, waard elke strip Whatman-papier bedekt mei biosurfaktant yn in konsintraasje fan 30, 40 of 50 mg/ml. Foarbedekte en net-bedekte papierstrips waarden test en fergelike yn it midden fan in petriskûtel. Elke petriskûtel befettet sawat tritich aktive termiten O. obesus. Kontrôle- en testtermiten krigen wiet papier as fiedingsboarne. Alle platen waarden by keamertemperatuer hâlden tidens de ynkubaasjeperioade. Termiten stoaren nei 12, 24, 36 en 48 oeren89,90. Fergeliking 1 waard doe brûkt om it persintaazje termytesterfte by ferskate biosurfaktantkonsintraasjes te skatten. (2).
De samples waarden op iis bewarre en ynpakt yn mikrotubes mei 100 ml 0,1 M natriumfosfaatbuffer (pH 7,4) en nei it Central Aquaculture Pathology Laboratory (CAPL) fan it Rajiv Gandhi Center for Aquaculture (RGCA). Histology Laboratory, Sirkali, Mayiladuthurai. District, Tamil Nadu, Yndia stjoerd foar fierdere analyze. De samples waarden fuortendaliks 48 oeren by 37 °C fiksearre yn 4% paraformaldehyde.
Nei de fiksaasjefaze waard it materiaal trije kear wosken mei 0,1 M natriumfosfaatbuffer (pH 7,4), stapsgewiis dehydratisearre yn ethanol en 7 dagen yn LEICA-hars wekt. De stof wurdt dan yn in plestik mal pleatst fol mei hars en polymerisator, en dan yn in oven pleatst dy't ferwaarme is oant 37 °C oant it blok mei de stof folslein polymerisearre is.
Nei polymerisaasje waarden de blokken snien mei in LEICA RM2235 mikrotoom (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, Feriene Steaten) ta in dikte fan 3 mm. De seksjes binne groepearre op objektglaasjes, mei seis seksjes per objektglaasje. De objektglaasjes waarden by keamertemperatuer droege, doe 7 minuten kleurd mei hematoxyline en 4 minuten wosken mei rinnend wetter. Derneist, bring de eosine-oplossing 5 minuten oan op 'e hûd en spielje 5 minuten ôf mei rinnend wetter.
Akute toksisiteit waard foarsein mei help fan wetterorganismen fan ferskate tropyske nivo's: 96-oere fisk LC50, 48-oere D. magna LC50, en 96-oere griene algen EC50. De toksisiteit fan rhamnolipide biosurfaktanten foar fisk en griene algen waard beoardiele mei ECOSAR-software ferzje 2.2 foar Windows ûntwikkele troch de US Environmental Protection Agency. (Beskikber online op https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Alle testen foar larviside en antytermytaktiviteit waarden yn triplikaat útfierd. Net-lineare regresje (logaritmyske funksje fan dosis- en termytmortaliteitsgegevens waarden útfierd om de mediane letale konsintraasje (LC50) te berekkenjen mei in fertrouwensynterval fan 95%, en konsintraasje- en responskurven waarden generearre mei Prism® (ferzje 8.0, GraphPad Software) Inc., Feriene Steaten) 84, 91.
De hjoeddeiske stúdzje lit it potinsjeel sjen fan mikrobiële biosurfaktanten produsearre troch Enterobacter cloacae SJ2 as muggenlarviside en antytermite-aginten, en dit wurk sil bydrage oan in better begryp fan 'e meganismen fan larviside en antytermite-aksje. Histologyske stúdzjes fan larven behannele mei biosurfaktanten lieten skea sjen oan it spiisfertarringskanaal, middendarm, harsenskorteks en hyperplasie fan intestinale epitheelsellen. Resultaten: Toksikologyske evaluaasje fan 'e antytermite- en larviside aktiviteit fan rhamnolipide biosurfaktant produsearre troch Enterobacter cloacae SJ2 liet sjen dat dit isolaat in potinsjeel biopestizid is foar de kontrôle fan troch fektors oerdroegen sykten fan muggen (Cx quinquefasciatus) en termiten (O. obesus). D'r is in needsaak om de ûnderlizzende miljeutoksisiteit fan biosurfaktanten en har potinsjele miljeu-ynfloeden te begripen. Dizze stúdzje biedt in wittenskiplike basis foar it beoardieljen fan it miljeurisiko fan biosurfaktanten.
Pleatsingstiid: 9 april 2024