DELLA aaiwiten wurde bewarre mastergroei tafersjochhâldersdy't in sintrale rol spylje by it kontrolearjen fan plantûntwikkeling yn reaksje op ynterne en miljeu-oanwizings. DELLA fungearret as in transkripsjeregulator en wurdt rekrutearre om promotors te doelen troch te binen oan transkripsjefaktoaren (TF's) en histon H2A fia har GRAS-domein. Resinte stúdzjes hawwe oantoand dat DELLA-stabiliteit post-translasjoneel regele wurdt troch twa meganismen: polyubiquitinaasje feroarsake troch it phytohormone gibberelline, wat liedt ta har rappe degradaasje, en konjugaasje fan lytse ubiquitin-like modifiers (SUMO) om har accumulation te fergrutsjen. Derneist wurdt DELLA-aktiviteit dynamysk regele troch twa ferskillende glycosylaasjes: de DELLA-TF-ynteraksje wurdt fersterke troch O-fucosylaasje, mar ynhibeare troch O-keppele N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) modifikaasje. De rol fan DELLA-fosforylaasje bliuwt lykwols ûndúdlik, om't eardere stúdzjes tsjinstridige resultaten hawwe toand, fariearjend fan dyjingen dy't sjen litte dat fosforylaasje DELLA-degradaasje befoardert of fermindert nei oaren dy't sjen litte dat fosforylaasje gjin ynfloed hat op syn stabiliteit. Hjir identifisearje wy fosforylaasjeplakken yn REPRESSORga1-3(RGA, AtDELLA) suvere fan Arabidopsis thaliana troch massaspektrometry-analyze en litte sjen dat fosforylaasje fan twa RGA-peptiden yn 'e PolyS- en PolyS/T-regio's H2A-bining en ferbettere RGA-aktiviteit befoarderet. Feriening fan RGA mei doelpromotors. Opmerklik hat fosforylaasje gjin ynfloed op RGA-TF-ynteraksjes as RGA-stabiliteit. Us stúdzje ûntbleatet it molekulêre meganisme wêrmei't fosforylaasje DELLA-aktiviteit induceart.
Om de rol fan fosforylaasje te ferklearjen by it regulearjen fan DELLA-funksje, is it kritysk om DELLA-fosforylaasjeplakken yn vivo te identifisearjen en funksjonele analyzes yn planten út te fieren. Troch affiniteitssuvering fan plantekstrakten folge troch MS / MS-analyse, identifisearren wy ferskate fosfositen yn RGA. Under betingsten fan GA-tekoart nimt RHA-phosphorylaasje ta, mar fosforylaasje hat gjin ynfloed op syn stabiliteit. Wichtich, co-IP en ChIP-qPCR assays die bliken dat fosforylaasje by de PolyS / T regio fan RGA befoarderet syn ynteraksje mei H2A en syn assosjaasje mei doel promoters, iepenbiere it meganisme troch hokker fosforylaasje induces RGA funksje.
RGA wurdt rekrutearre om chromatine te rjochtsjen troch de ynteraksje fan it LHR1-subdomein mei TF en bindet dan oan H2A fia syn PolyS/T-regio en PFYRE-subdomein, en foarmje it H2A-RGA-TF-kompleks om RGA te stabilisearjen. Fosforylaasje fan Pep 2 yn 'e PolyS / T-regio tusken it DELLA-domein en it GRAS-domein troch in net identifisearre kinase fersterket RGA-H2A-bining. It rgam2A-mutante proteïne slacht RGA-fosforylaasje ôf en nimt in oare proteïnekonformaasje oan om te bemuoien mei H2A-bining. Dit resultearret yn destabilisaasje fan transiente TF-rgam2A-ynteraksjes en dissosjaasje fan rgam2A fan doelchromatin. Dizze figuer toant allinich RGA-bemiddele transkripsjonele ûnderdrukking. In ferlykber patroan koe wurde beskreaun foar RGA-bemiddele transkripsjonele aktivearring, útsein dat it H2A-RGA-TF-kompleks de transkripsje fan doelgenen befoarderje en defosforylaasje fan rgam2A de transkripsje soe ferminderje. Figure feroare út Huang et al.21.
Alle kwantitative gegevens waarden statistysk analysearre mei Excel, en signifikante ferskillen waarden bepaald mei help fan Student syn t test. Gjin statistyske metoaden waarden brûkt om foarôf te bepalen fan de stekproefgrutte. Gjin gegevens waarden útsletten fan 'e analyze; it eksperimint wie net willekeurich; de ûndersikers wiene net blyn foar de ferdieling fan gegevens tidens it eksperimint en de evaluaasje fan de resultaten. De stekproef grutte wurdt oanjûn yn de figuer leginde en boarne gegevens triem.
Foar mear ynformaasje oer it stúdzjeûntwerp, sjoch it Natural Portfolio Report Abstract ferbûn mei dit artikel.
Massaspektrometry-proteomykgegevens binne bydroegen oan it ProteomeXchange-konsortium fia it PRIDE66-partnerrepository mei datasetidentifikator PXD046004. Alle oare gegevens krigen tidens dizze stúdzje wurde presintearre yn 'e Supplementary Information, Supplementary Data Files, and Raw Data Files. Boarne gegevens wurde levere foar dit artikel.
Post tiid: Nov-08-2024